هناك أربعة عوامل رئيسية تؤثر على فعالية الأنزيم وهي: -

1 - درجة الحرارة Temperature

2 - درجة الأس الهيدروجيني PH

3 - تركيز المادة الأساس substrate concentration.

4- تركيز الأنزيم enzyme concentration.

1. ارتفاع درجة الحرارة:

إن ارتفاع درجة الحرارة يزيد من فعالية الأنزيم بشرط ألا يزيد هذا الارتفاع إلى الحد الذي يؤدي إلى مسخ الأنزيم (دنترة الأنزيم) حيث أن ارتفاع درجة الحرارة يعمل على زيادة الطاقة الحركية لجزيئة الأنزيم وبالتالي إلى زيادة الاحتكاك بين الأنزيم والمادة الأساس وان زيادة درجة الحرارة عن 50 مئوية بصورة عامة تؤدي إلى فقدان الأنزيم لخواصه الطبيعية وبالتالي يترسب فاقدا فعاليتة البايولوجية.

2- تأثير تركيز المادة الأساس

عند زيادة تركيز المادة الأساس فان سرعة التفاعل الأنزيمي تزداد إلى الحد الذي لا يحدث بعده أي زيادة في هذه السرعة بحيث تبقى سرعة التفاعل ثابته مهما زاد تركيز المادة الأساس وعند هذه النقطة يطلق على سرعة التفاعل بالسرعة القصوى (max Maximum Velocity) حيث تكون جزيئة الأنزيم مشبعة بالمادة الأساس بحيث تنخفض سرعة التفاعل الأنزيمي بعد هذه النقطة عند زيادة تركيز المادة الأساس وقد افترض ميكليس - مينتين معادلة بذلك كما هو موضح أدناه:

حيث أن السرعة الابتدائية =V

السرعة القصوى =Vmax

تركيز المادة الأساس =S

ثابت ميكليس – مينتين= Km وهو قيمة تركيز المادة الأساس عند نصف السرعة القصوى

3- تركيز الأنزيم: - عند زيادة تركيز جزيئات الأنزيم مع ثبات تركيز المادة الأساس فان ذلك يؤدي في البداية إلى زيادة سرعة التفاعل الأنزيمي إلى أن يصل إلى سرعته القصوى كما ذكرنا سابقا وبعد الوصول إلى هذه النقطة سوف تنخفض سرعة التفاعل

4- تأثير درجة الأس الهيدروجيني PH:- بما أن الأنزيمات هي عبارة عن مواد بروتينية فان أي تغير في ال PH سوف يؤثر تأثيرا كبيرا على الصفات الأيونية للمجاميع الامينية والكاربوكسيلية الموجودة في جزيئة البروتين وبالتالي سوف تؤثر على الموقع الفعالة للأنزيم وكذلك على هيئته وشكله إضافة إلى القيم العالية أو الواطئة نوعا ما من الـ PH سوف تؤدي إلى تغير الحالة الطبيعية للبروتين Denaturation ومن ثم إلى الإقلال من فعالية الأنزيم وان لكل أنزيم PH مثالي optimum يعمل فيه ذلك الأنزيم بطاقتة القصوى كما موضح في الأمثلة التالية: