تقدير متبقيات مبيدات الكلور العضوية في دم الانسان

متطلبات العملية

1) جهاز الكروماتوغرافي الغازي السائل (GLC) مع كاشف اسر الالكترونات.

2) خلاط كهربائي.

3) حمام مائي.

4) جهاز طرد مركزي.

5) Micro syringe .

6) انابيب زجاجية، سحاحات.

۷) هكسان نقي.

طريقة اخذ العينة

يتم اخذ عينة الدم من المتبرع وهي بحدود 7 - 15 مل يتم نقلها الى قنينة نظيفة ذات غطاء مغلف بالقصدير ومن الضروري عدم استخدام قنان ذات غطاء بلاستيكي او مطاطي يتم حفظ العينة في الثلاجة لمدة نصف ساعة لضمان استقرار العينة بعد ذلك توضع في جهاز طرد مركزي لفصل كمية من مصل الدم بحدود 3 مل على الاقل وذلك بتشغيل الجهاز لمدة 10 دقائق على سرعة 2500 دورة في الدقيقة. وفي حالة عدم تحليل العينة مباشرة تخزن على درجة حراة 2 – 5 م في الثلاجة وإذا كانت عملية التحليل ستتم بعد عدة ايام فتخزن في مجمدة تحت درجة حرارة بين - 15 م الى - 25 م.

طريقة العمل

1) امزج عينة مصل الدم بصورة جيدة وبواسطة الماصة انقل 2 مل منها الى انبوبة اختبار.

2) أضف 6 مل هكسان ثم سد فتحة الانبوبة بغطاء مغلف بورق قصدير.

3) ضع الانبوبة على جهاز بسرعة 50 دورة في الدقيقة ولمدة ساعتين.

4) انقل بعد ذلك 5 مل من مستخلص الهكسان الى انبوبة اختبار اخرى سعة 10 مل.

5) ضع الانبوبة في صمام مائي عند درجة حرارة 100م الى ان يصبح الحجم المتبقي في الانبوبة بحدود 1.5-1 مل.

6) اترك الانبوبة بعد ذلك لتبرد ثم اغسل جوانب الانبوبة بقليل من الهكسان.

7) اغلق الانبوبة ثم ضعها على خلاط بسرعة عالية لمدة 30 ثانية.

8) بعد ذلك تكون العينة جاهزة للحقن في جهاز الكروماتوغرافي الغازي السائل.

9) يتم اجراء نفس الخطوات السابقة على عينة دم ثابتة تحوي كمية معلومة من أحد مبيدات الكلور العضوية.

الحسابات: - لتحديد كمية مبيدات الكلور العضوية الموجودة في عينة الدم يمكن اتباع المعادلة الآتية: -

               abx

ppb = -------- X 0.6

                cy

حيث ان

كمية المبيد بالنانوغرام في قمة منحني العينة القياسية  a =

ارتفاع قيمة المنحني للعينة = b

ارتفاع قمة المنحني للعينة القياسية c =

الحجم النهائي للمستخلص مقدراً بالمايكروملليتر x =

حجم المستخلص بالمايكروملليتر الذي حقن في الجهاز y =

مثال ذلك

a = 0.3

b = 80 mm

c = 90 mm

x = 1000 ml.

y = ml

                 0.3 x 80 x 1000

ppb = ---------------- X 32 ppb

                       90 x 5