المرجع الالكتروني للمعلوماتية
المرجع الألكتروني للمعلوماتية

علم الاحياء
عدد المواضيع في هذا القسم 10456 موضوعاً
النبات
الحيوان
الأحياء المجهرية
علم الأمراض
التقانة الإحيائية
التقنية الحياتية النانوية
علم الأجنة
الأحياء الجزيئي
علم وظائف الأعضاء
المضادات الحيوية

Untitled Document
أبحث عن شيء أخر


Plate count method APHA 2001 for Enterobacteriaceae in foods  
  
2025   11:29 صباحاً   date: 18-3-2016
Author : SILVA, N.D .; TANIWAKI, M.H. ; JUNQUEIRA, V.C.A.; SILVEIRA, N.F.A. , NASCIMENTO , M.D.D. and GOMES ,R.A.R
Book or Source : MICROBIOLOGICAL EXAMINATION METHODS OF FOOD AND WATE A Laboratory Manual
Page and Part :

Plate count method APHA 2001 for Enterobacteriaceae in foods

 

Method of the American Public Health Association (APHA), as described in  the 4th Edition of the Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods (Kornacki and Johnson, 2001).

1-  Material required for analysis

Preparation of the sample and serial dilutions

•  Diluent: 0.1% Peptone Water (PW) or Butterfield’s Phosphate Buffer

•  Dilution tubes containing 9 ml 0.1% Peptone Water (PW) or Butterfield’s Phosphate Buffer

Enumeration (pour plate)

•  Sterile, empty 20 × 100-mm Petri dishes

•  Culture medium: Violet Red Bile Glucose (VRBG) Agar

•  Laboratory incubator set to 35 ± 1°C

2 - Procedure

A general flowchart for the enumeration of Enterobacteriaceae in foods using the plate count method APHA 2001 is shown in Figure 1.

a)  Preparation of the samples and serial dilutions.

b) Inoculation. Select three appropriate dilutions of

the sample and inoculate in  Violet Red Bile Glucose (VRBG) Agar. Use the pour plate technique and, after complete solidification of the medium, cover the surface with a 5–8 ml thick layer of the same medium.

c) Incubation. Incubate the plates in an inverted position at 35 ± 1°C/18–24 h.

d) Counting of the colonies and calculating the results. Select plates with 15–150 colonies and count only the typical  Enterobacteriaceae colonies on the VRBG medium: red-purple, 0.5 mm or greater in diameter, surrounded by a reddish halo characteristic of the precipitation of the bile salts.

On crowded plates the colonies may remain small and fail to reach 0.5 mm. Determine the number of CFU/g or ml by multiplying the number of typical colonies by the inverse of the dilution.

Figure 1   Scheme of analysis for the enumeration of Enterobacteriaceae in foods using the plate count method APHA 2001 (Kornacki and Johnson, 2001).

 

References

Silva, N.D .; Taniwaki, M.H. ; Junqueira, V.C.A.;  Silveira, N.F.A. , Nasdcimento , M.D.D. and Gomes ,R.A.R .(2013) . Microbiological examination methods of food and water a laboratory Manual. Institute of Food Technology – ITAL, Campinas, SP, Brazil .

Kornacki, J.L. & Johnson, J.L. (2001) Enterobacteriaceae, coliforms, and Escherichia coli as quality and safety indicators. In: Downes, F.P. & Ito, K. (eds).  Compendium of Methods for the Microbio-logical Examination of Foods. 4th edition. Washington, American Public Health Association. Chapter 8, pp. 69–82.




علم الأحياء المجهرية هو العلم الذي يختص بدراسة الأحياء الدقيقة من حيث الحجم والتي لا يمكن مشاهدتها بالعين المجرَّدة. اذ يتعامل مع الأشكال المجهرية من حيث طرق تكاثرها، ووظائف أجزائها ومكوناتها المختلفة، دورها في الطبيعة، والعلاقة المفيدة أو الضارة مع الكائنات الحية - ومنها الإنسان بشكل خاص - كما يدرس استعمالات هذه الكائنات في الصناعة والعلم. وتنقسم هذه الكائنات الدقيقة إلى: بكتيريا وفيروسات وفطريات وطفيليات.



يقوم علم الأحياء الجزيئي بدراسة الأحياء على المستوى الجزيئي، لذلك فهو يتداخل مع كلا من علم الأحياء والكيمياء وبشكل خاص مع علم الكيمياء الحيوية وعلم الوراثة في عدة مناطق وتخصصات. يهتم علم الاحياء الجزيئي بدراسة مختلف العلاقات المتبادلة بين كافة الأنظمة الخلوية وبخاصة العلاقات بين الدنا (DNA) والرنا (RNA) وعملية تصنيع البروتينات إضافة إلى آليات تنظيم هذه العملية وكافة العمليات الحيوية.



علم الوراثة هو أحد فروع علوم الحياة الحديثة الذي يبحث في أسباب التشابه والاختلاف في صفات الأجيال المتعاقبة من الأفراد التي ترتبط فيما بينها بصلة عضوية معينة كما يبحث فيما يؤدي اليه تلك الأسباب من نتائج مع إعطاء تفسير للمسببات ونتائجها. وعلى هذا الأساس فإن دراسة هذا العلم تتطلب الماماً واسعاً وقاعدة راسخة عميقة في شتى مجالات علوم الحياة كعلم الخلية وعلم الهيأة وعلم الأجنة وعلم البيئة والتصنيف والزراعة والطب وعلم البكتريا.