تفاعل الكوثرة الكمي Real-time PCR

طريقة مختبرية تعتمد أساساً على تفاعل إنزيم كوثرةPCR) DNA) ولكن ترافق العملية تحديد كمية او جزيئات DNA المستهدفة من التضخيم اي انها تساعد في تحديد عدد نسخ قطع DNA المستخدمة ، ويكون ذلك أما باستعمال صبغات متفلورة التي تنحشر بين أشرطة DNA المزدوجة وبذا يزداد الوميض في كل دورة تضاعف ويمكن قياس شدة الوميض وبالتالي تركيز DNA او بتحوير مجسات النيوكليوتيدات المتعددة المستعملة في التفاعل بحيث تعطي وميض عندما يتم ارتباطها او تهجينها مع DNA المكمل لها.
ويمكن لهذه الطريقة ان تستعمل لتحديد كمية mRNA وبالتالي التعبير عن الجينات في الجسم وتأثير المواد فيها وذلك بزيادة خطوة قبل عملية التضخيم وهي استعمال mRNA لبناء cDNA الذي ستتم مضاعفته والذي يكون ناتجاً من تأثير إنزيم النسخ العكسي Reverse Transcriptase لتحويل mRNA الى cDNA .

وتختصر الطريقة الى RT-PCR وهي الأكثر استعمالاً ولكن يمكن ان تستعمل المختصرات Q- ، RTQ-PCRq-PCR ، PCR وللطريقة تطبيقات عدة ، فهي تستخدم في حالات التشخيص او للأغراض البحثية ، فقد استعملت في تشخيص الأمراض الناتجة عن الإصابات مثل وجود Listeria monocytogenes في الأغذية او السرطان او التشوهات الوراثية فضلاً عن استعمالها في الدراسات البيئية .