كيفية تشخيص الأمراض المتسببة عن الفطريات

يمكن تشخيص الأمراض الفطرية بطريقة ناجحة عن طريق:

• معرفة القواعد الأساسية لتصنيف الأمراض النباتية
• معرفة صفات الفطريات الممرضة المسببة للأمراض النباتية
• معرفة أعراض وعلامات المرض المصاحبة للإصابة الفطرية.
• معرفة المصطلحات العلمية المستعملة فددي وصف أعراض الأمراض الفطرية.

والهدف من تشخيص المرض النباتي هو التعرف على المسبب الرئيسي للمرض وتشتمل عملية تشخيص المرض على خطوات تستخدم فيها أدوات متخصصة.

ويتطلب تشخيص المرض النباتي أن يكون الشخص القائم بعملية التشخيص لديه معرفة تامة بالقواعد الأساسية لتصنيف الأمراض النباتية ومعرفة تامة بصفات الكائنات الحيدة الدقيقة المسببة للأمراض النباتية (الفطر – البكتيريا – الفيروس – الفيرويد – فيتوبلازما – النباتات المتطفلة). ومعرفة تامة بالاصطلاحات الخاصة لوصف الأعراض المرضية وعلامات المرض (ميسليوم الفطر – الجراثيم – الأجسام الثمرية) مع قوائم أمراض النبات ومشاهدة الأعراض على الجذور وأوراق أو جذوع أو أزهار ومعرفة هوية النبات: تعريف اسم النبات وأسم الصنف

• وصف للأعراض المميز.
• البحث عن علامات المرض (وجود ميسيليوم – جراثيم فطرية – عن طريق استخدام عدسة يدوية
• استخدام المجاهر المركبة والتشريحية.
• هل ترتبط الأعراض بأجزاء معينة من النبات.

ويعدد الهدف الأساسي لتشخيص المرض النباتي هو التعرف على المسبب المرضي الرئيسي ولابد مدن استعمال أدوات متخصصة مثل المجهر التشريحي والمجهر المركب وغيرها من الأدوات الضرورية الموجود في عيادات تشخيص المرض النباتي.

خطوات تشخيص المرض النباتي تشمل:

1- معرفة اسم النبات والصنف وجميع المعلومات المتعلقة بالعائل النبات.

2- جمع عينات تظهر عليها أعراض مرضية جيد وممثلة للنباتات المصابة.

3- فحص ووصف أعراض وعلامات المرض النباتي.

4- الاستعانة ببعض المراجع المتخصصة لوصف الأمراض على العوائل النباتية.

5- تعريف المرض النباتي عن طريق مقارنة ووصف الحالة المرضية بما سبق نشره في المراجع العلمية.

معرفة هوية النبات (اسم العائل النباتي والصنف) ومعلومات أخرى متعلقة بالنبات [ وقت الزراعة- مصدر البذور – نوع التربة (رملية – طينية). العمليات الزراعية (الري والتسميد والمبيدات) تاريخ المرض الحصول على عينات جيدة ممثلة من النباتات المصابة ثم وصف أعراض وعلامات المرض والحصول على مراجع متخصصة لوصف أعراض الأمراض الفطرية.

وفيما يلي نموذج البيانات المطلوبة لتشخيص المرض النباتي:

اسم الشركة أو المزرعة:........................... تليفون............

العنوان:.............................. ............................. E-mail

اسم المحصول:......... تاريخ الزراعة:.......... اسم الصنف:............

مظهر الأجزاء النباتية المصابة:

الجذور: □ طبيعية □ ضعيفة النمو □ تدرنات □ تلون الجذور □ عفن جذور

مظهر الإصابة:...............................................................

الساق أو الأفرع: □ طبيعية □ بقع □ تقرحات □ تدرنات □ ذبول

مظهر الإصابة:...............................................................

الأزهار أو الثمار: □ طبيعية □ بقع أو تقرحات □ عفن □ تبرقش

انتشار الإصابة: □ نباتات متفرقة □ مجاميع نباتية □ مع م النباتات

□ الأوراق السفلية □ الأوراق العلوية □ أوراق موزعة عشوائيا

بداية ظهور الأعراض: □ أيام □ أسابيع □ أشهر

الظروف المناخية التي تساعد على تكشف الأعراض:

□ درجة الحرار مرتفعة □ درجة حرار منخفضة □ رطوبة مرتفعة □ رياح

نوع التربة: □ رملية □ تربة ملحية □ تربة طينية □ بيت موس

المعاملات الكيميائية للمحصول:

□ بذور معاملة بالمبيدات □ مبيدات حشائش □ أسمد □ مبيدات فطرية □ مبيدات

حشرية:.........................................................

الملاح ات العامة للمشكلة:.................................................

كيفية جمع العينات النباتية لتشخيص المرض النباتي:

• يتم جمع عينات تمثل مراحل مختلفة من تكشف الأعراض.
• يتم جمع جذور النباتات مع التربة المحيطة بها في كيس بلاستك.
• الأجزاء النباتية الأخرى توضع في أكياس ورقية.
• ذبول الأشجار: يتم جمع أفرع بطول 5سم وبقطر 2سم يشمل الجزء المصاب مع جزء سليم.
• تعبئة نموذج (جمع العينات) البيانات المطلوبة لتشخيص المرض.

توضع العينات بعد جمعها في ثلاجة وترسل مباشر إلي معمل تشخيص الأمراض النباتية.

عدم وضع عينات المجموع الخضر مع عينات المجموع الجذري فدي كيس واحد، بل توضع كل عينة منفصلة عن الأخرى.

مواصفات جمع العينات النباتية ذات الطابع الخاص:

التدرنات – التقرحات Canker and Galls

تقطع أنسجة التدرنات على بعد سنتيمترات أسفل الأعراض.

يتم جمع العديد من أنسجة التدرنات مع أقل حجم ممكن.

تجنب العينات الميتة أو القديمة العمر.

أعراض موت القمة Diebacks

تقطع أنسجة أعراض موت القمة (الموت الرجعي) للنبات المصاب بحيث تشمل على جزء من النسيج الحي.

يتم جمع عينات من جذور النبات الذي يظهر عليه أعراض موت القمة وتوضع الجذور مع التربة المحيطة بها حيث تشمل أيضا على بعض الجذور المغذية.

أمراض الثمار ( Fruit diseases )

يتم وصف الأعراض على الثمار.

عدم وضع الثمار في أكياس من البلاستيك لمنع زياد الرطوبة.

1- توضع الثمار في أكياس من الورق.

تبقعات ولفحة الأوراق والأزهار (Spots and blights of leaves and flowers) :

يتم جمع عدد 12 ورقة على الأقل يظهر عليها الأعراض.

تمثل الأعراض الظاهر على الأوراق مراحل مختلفة من تكشفها.

توضع الأوراق بين ورق نشاف أو ورق ترشيح.

تجنب وضع الأوراق داخل أكياس بلاستيك لتجنب عفن الأوراق.

يتم وصف الأعراض لاحتمال تغير اللون.

الأعراض الجهازية Systematic symptoms

وتشمل أعراض الاصفرار - الذبول - التقزم - تساقط الأوراق – أعراض موت القمة - أعراض تدهور النبات. مثل هذه الأعراض غالبا ما ترجع إلي تضرر المجموع الجذر أو أمراض الجذور. ينزع النبات بالكامل مع المجموع الجذري والتربة المحيطة بالجذور إذا كان حجم النبات يسمح بذلك.

توضع الجذور مع التربة المحيطة بها في كيس بلاستيك.

تجمع أجزاء من المجموع الخضر وتوضع في أكياس ورقية.

أعداد معمل لتشخيص الأمراض النباتية

يجب أن يكون موقع وتصميم المعمل بعيدا عن التيارات الهوائية وتكون نوافذه مصممة لتقليل التلو الداخلي للمعمل وتكون أرضيته وجدرانه ناعمة ومصقولة ليسهل تطهير وتنظيف المعمل يوميا.

وعادة يلحق بالمعمل غرفة للعزل مزودة بالكهرباء والغاز ومصباح من الأشعة فوق البنفسجية. ويجب أن يتوفر أيضا بالمعمل العديد من الأجهزة والأدوات والمواد الكيماوية والبيئات والحد الأدنى لها كما يلي:

أولاً الأجهزة:

مجاهر تشريحية ومجاهر مركبة، أوتوكلاف (جهاز تعقيم بالبخار تحت ضغط، حضانات، ثلاجات (لحفظ العينات المرضية) أفران الهواء الساخن( لتعقيم الأدوات والزجاجيات)، حمامات مائية، أجهز لقياس الحموضة pH meters ، أجهزة  الدرج Shakers ، أجهزة تقطير المياه، موازين Balances أجهز طرد مركز Centrifuges خلاط Waring blender.

ثانياً الأدوات:

أطباق بتري بلاستكية أو زجاجية معقمة، شرائح زجاجية وأغطية شرائح أنابيب اختبار وحوامل أنابيب اختبار، ماصات pipettes ، كؤوس زجاجية، دوارق مخروطية، نواقيس زجاجية Bell jars أوعية لحفد العينات Specimen jars ، أدوات تشريح (ملاقط – ابر سهمية – أبر مستقيمة – ابر ذات العقدة – مقص) أقلام تعليم للكتابة على الزجاج والبلاستيك.

ثالثاً: مواد كيماوية تستخدم في التعقيم:

1- محلول هيبوكلوريت الصوديوم (كلوركس تجار):

ويستخدم محلول الكلوركس التجاري بتركيز 10% (10 مل كلوركس تجاري: 90 مل ماء معقم) في التعقيم السطحي للبنشات والتعقيم السطحي للأجزاء النباتية المصابة لعزل المسببات المرضية.

2- كحول الإيثايل Ethyl alcohol :

يستخدم بتركيز 10% لتطهير الأيدي والعينات النباتية المصابة وتعقيم البنشات

3- الفينول Phenol :

يستخدم بتركيز 2-5% للتعقيم السطحي لجدران وأرضيات المعمل ولحفظ العينات والنماذج المرضية.

رابعاً: الصبغات ومحاليل التحميل:

يجب صبغ (Staining) العينات حتى يمكن فحصها ميكروسكوبيا (معظم الفطريات ومقاطع الأنسجة النباتية) وأهم الصبغات الأكثر شيوعا في معامل أمراض النبات.

1- الصفرانيين Safranin: ميسيليوم والجراثيم الفطريات – خلايا بشرة النبات.

2- أزرق القطن Cotton Blue : ميسيليوم وجراثيم الفطريات.

3- محلول اللاكتوفينول: عبار عن خليط من حامض اللاكتيدك- الجلسرول – والماء والفينول وهو يعطي صور جيدة اثناء الفحص المجهري ويضاف إليه أزرق القطن لإعطاء اللون للعينات الشفافة.

توضع نقطة من محلول التحميل (اللاكتوفينول) على شريحة مجهرية ثم توضع العينة (ميسيليوم أو جراثيم الفطر) وتستخدم ابر تشريح لوضع العينة ثم ينزل غطاء الشريحة تدريجيا برفق وعناية لتقليل الفقاعات الهوائية.

يمكن استخدام الشريط اللاصق Cellophane tape بتعريض الجانب اللاصق للمزرعة الفطرية مما يؤد إلي التصاق الجراثيم ثم يوضع فوق نقطة محلول اللاكتوفينول وبذلك يعمل الشريط اللاصق عمل غطاء الشريحة.

خامساً: البيئات المغذية:

تعد اختيار البيئة المغذية من أهم العناصر لنجاح عملية عزل المسبب المرضي من الأنسجة النباتية أو من التربة، وعاد تستعمل بيئات مغذية صلبة حي يضاف لها ماد الآجار وتتميز بأنها تصلب البيئة السائلة وتعطي سطحا متماسكا وبالتالي يسهل ملاحظة النموات الفطرية أو التراكيب الثمرية التي يكونها الفطر (تحتوي معظم البيئات على 20 جم من ماد الآجار لكل لتر من البيئة المغذية)، والبيئات المحتوية على ماد الآجار تنصهر عند درجة حرار 95م وتتجمد عند درجة حرار 40م ، وتستخدم أطباق بتر التي تحتو على البيئة المغذية في عملية العزل حتى يسهل تعريف الفطريات الممرضة، وتنقل المزارع الفطرية بعد تنقيتها إلي انابيب الآجار المغذ المائلة لحفظها في الثلاجة على درجة حرار 5م.

توجد أنواع عديد من البيئات المغذية فقدد تكدون من مستخلصات نباتية مثل بيئة اجار البطاطس والدكستروز( PDA) أو بيئات تركيبية معروفة التركيب الكيماوي مثل بيئة تشابك دوكس. وتوجد بيئات أخرى متخصصة لعزل الفطريات.

من الأنسجة النباتية أو من التربة مثل بيئة كومادو Komdo media لعزل الفطر فيوزاريوم Fusarium spp.

المصدر

يونس يوسف مولان و صلاح الدين الحسيني محمد و ياسر عيد إبراهيم (2008) تشخيص الأمراض الفطرية وطرق مكافحتها.