علم الكيمياء
تاريخ الكيمياء والعلماء المشاهير
التحاضير والتجارب الكيميائية
المخاطر والوقاية في الكيمياء
اخرى
مقالات متنوعة في علم الكيمياء
كيمياء عامة
الكيمياء التحليلية
مواضيع عامة في الكيمياء التحليلية
التحليل النوعي والكمي
التحليل الآلي (الطيفي)
طرق الفصل والتنقية
الكيمياء الحياتية
مواضيع عامة في الكيمياء الحياتية
الكاربوهيدرات
الاحماض الامينية والبروتينات
الانزيمات
الدهون
الاحماض النووية
الفيتامينات والمرافقات الانزيمية
الهرمونات
الكيمياء العضوية
مواضيع عامة في الكيمياء العضوية
الهايدروكاربونات
المركبات الوسطية وميكانيكيات التفاعلات العضوية
التشخيص العضوي
تجارب وتفاعلات في الكيمياء العضوية
الكيمياء الفيزيائية
مواضيع عامة في الكيمياء الفيزيائية
الكيمياء الحرارية
حركية التفاعلات الكيميائية
الكيمياء الكهربائية
الكيمياء اللاعضوية
مواضيع عامة في الكيمياء اللاعضوية
الجدول الدوري وخواص العناصر
نظريات التآصر الكيميائي
كيمياء العناصر الانتقالية ومركباتها المعقدة
مواضيع اخرى في الكيمياء
كيمياء النانو
الكيمياء السريرية
الكيمياء الطبية والدوائية
كيمياء الاغذية والنواتج الطبيعية
الكيمياء الجنائية
الكيمياء الصناعية
البترو كيمياويات
الكيمياء الخضراء
كيمياء البيئة
كيمياء البوليمرات
مواضيع عامة في الكيمياء الصناعية
الكيمياء الاشعاعية والنووية
تزيد التنقية من النشاط النوعي
المؤلف:
د. روبرت موراي وآخرون
المصدر:
هاربرز في الكيمياء الحيوية
الجزء والصفحة:
ص 231
1-6-2021
2455
تزيد التنقية من النشاط النوعي
إن الهدف من تنقية الإنزيمات هو عزل إنزيم معين من خلاصة خلوية خام تحتوى على عدد من المكونات الأخرى. ويمكن نزع الجزيئات الصغيرة بواسطة الديال أو الترشيح الهلامي، وتنزع الأحماض النووية بالترسيب بالمضاد الحيوى الستربتوهيسين وهكذا. لكن المشكلة تكمن في فصل الإنزيم المطلوب من بين مئات البروتينات المماثلة له كيميائياً وفيزيائياً.
يظهر (الجدول 8-2) تطور التقنية النموذجية لتنقية أحد الإنزيمات الكبدية. هذا التطور أدى إلى الحصول على نقاوة إجمالية زادت بقدار 490 ضعفاً. لاحظ كيف تم حساب مقدار النشاط والكشف (Recovery) النوعي للنشاط الأولي. والهدف هو الحصول على أقصى نشاط نوعي (عدد وحدات الإنزيم في كل 1 ملج من البروتين)، مع أفضل نسبة كشف ممكنة للنشاط الأولي.
الشكل 8-5 : المقايسة المقترنة لنشاط الهكسوكيناز. يقرن التفاعل بتفاعل محفز بنازعة هيدروجين ابلوكوز - 6 -فسفات (G6P). ويضاف كل من نازعة هيدروجين ابلوكوز — 6 — فسفات وابلوكوز والأتب (ATP) وأيونات المغنزيوم وثنائي نوكليوتيد الأدينين والنيوكوتين أميد المفسفت (+NADP) بكميات زائدة. يسمح ذلك لكمية الهكسوكيناز الموجودة بتحديد المعدل الإجمالي للتفاعل المقترن ومعدل تشكل ثنائي نوكليوتيد الأدينين والنيوكوتين أميد المفسفت الاتزل (NADPH).
يمكن قياس هذا الأخير عند طول الموجة 340 نم.