1

المرجع الالكتروني للمعلوماتية

علم الكيمياء

تاريخ الكيمياء والعلماء المشاهير

التحاضير والتجارب الكيميائية

المخاطر والوقاية في الكيمياء

اخرى

مقالات متنوعة في علم الكيمياء

كيمياء عامة

الكيمياء التحليلية

مواضيع عامة في الكيمياء التحليلية

التحليل النوعي والكمي

التحليل الآلي (الطيفي)

طرق الفصل والتنقية

الكيمياء الحياتية

مواضيع عامة في الكيمياء الحياتية

الكاربوهيدرات

الاحماض الامينية والبروتينات

الانزيمات

الدهون

الاحماض النووية

الفيتامينات والمرافقات الانزيمية

الهرمونات

الكيمياء العضوية

مواضيع عامة في الكيمياء العضوية

الهايدروكاربونات

المركبات الوسطية وميكانيكيات التفاعلات العضوية

التشخيص العضوي

تجارب وتفاعلات في الكيمياء العضوية

الكيمياء الفيزيائية

مواضيع عامة في الكيمياء الفيزيائية

الكيمياء الحرارية

حركية التفاعلات الكيميائية

الكيمياء الكهربائية

الكيمياء اللاعضوية

مواضيع عامة في الكيمياء اللاعضوية

الجدول الدوري وخواص العناصر

نظريات التآصر الكيميائي

كيمياء العناصر الانتقالية ومركباتها المعقدة

مواضيع اخرى في الكيمياء

كيمياء النانو

الكيمياء السريرية

الكيمياء الطبية والدوائية

كيمياء الاغذية والنواتج الطبيعية

الكيمياء الجنائية

الكيمياء الصناعية

البترو كيمياويات

الكيمياء الخضراء

كيمياء البيئة

كيمياء البوليمرات

مواضيع عامة في الكيمياء الصناعية

الكيمياء الاشعاعية والنووية

علم الكيمياء : الكيمياء التحليلية : التحليل الآلي (الطيفي) :

Molecular Fluorescence: Experimental Procedure

المؤلف:  LibreTexts Project

المصدر:  ................

الجزء والصفحة:  .................

22-4-2020

1571

Molecular Fluorescence: Experimental Procedure

This experiment involves the analysis of vitamin B2, riboflavin, by measuring its native fluorescence. Riboflavin (Figure 1.1) is a common water-soluble vitamin found in eggs, milk, and other foods, that strongly fluoresces and is very sensitive to light. Its two predominant irradiation decomposition products are lumichrome and lumiflavin, which are themselves highly fluorescent.

image024.jpg

Figure 1.1: Riboflavin (A) and the two most predominant irradiation decomposition products, lumiflavin (B) and lumichrome (C).

The analysis method requires working with riboflavin samples at concentrations well below the part per million (ppm) level. Therefore, it is extremely important that the utmost care is exercised in cleaning and handling all of the glassware and solutions during this experiment.

In the first lab period, the standard and unknown solutions mentioned below should be prepared. Later during this period, you should consult the T.A. about operating the UV VIS spectrophotometer as well as the fluorescence spectrometer. You should also obtain the absorption spectra of riboflavin and perform a practice run on the fluorescence spectrometer.

 

The second lab period should be used to complete the experiment and Part II of the unknown analysis.

Stock Solutions

  1. Obtain the 100 ppm stock standard solution of Riboflavin from the refrigerator or from the T.A.
  2. Allow the solution to sit on the counter for a few minutes to equilibrate to room temperature. This is to ensure consistent volume measurements.
  3. Deliver 1 mL of the stock solution to a 10 mL volumetric flask and dilute using deionized water. This is your 10 ppm solution.
  4. Using a volumetric pipet, deliver 1.00 mL of the 10 ppm solution to a 100 mL volumetric flask, and dilute using deionized water. This is your 100 part per billion (ppb) stock solution.
  5. Fill in Table 1.1 with the correct amounts of 100 ppb riboflavin to make the remainder of your standards. Check the table with your TA before you begin the experiment.
  6. Make the solutions 2-6 from the table and dilute with deionized water. Make certain that your glassware is clean and rinsed with deionized water.

Table 1.1: Standard Riboflavin Solutions

Solution # mL of 100 ppb sol. Dilute to (mL) Rib. Conc (ppb)
2   50 2
3   50 10
4   50 20
5   50 40
6   50 50

Unknown Solution

The dry milk sample should be reconstituted as indicated on the jar. Record your work (this is a quantitative experiment). The milk samples require special treatment in order to remove interfering fats and proteins, which would otherwise make analysis difficult or impossible. The procedure to accomplish this is outlined below.

  1. Find the dry milk sample on the shelves above the weigh station.
  2. Reconstitute the dry milk sample by following the directions listed on the sample jar.
  3. Take 25 mL of milk sample and add exactly 75 mL of a solution consisting of equal parts 3M HAc and 3M NaCl. Do not use a volumetric flask for this. It is too difficult to stir the solution. Use your 25 mL pipet and a 250 or 400 mL beaker.
  4. Stir for 20 minutes.
  5. Filter the solution using a Buchner funnel and the vacuum line. Make sure you have a trap between the filtering flask and the house vacuum line.
  6. Take a 5 mL aliquot of the filtrate and dilute to 100 mL with deionized water in a volumetric flask. This solution will be used for your analytical measurements.
EN

تصفح الموقع بالشكل العمودي